Ďakujeme, že ste navštívili Nature.com.Verzia prehliadača, ktorú používate, má obmedzenú podporu CSS.Pre najlepší zážitok vám odporúčame použiť aktualizovaný prehliadač (alebo vypnúť režim kompatibility v programe Internet Explorer).Medzitým, aby sme zabezpečili nepretržitú podporu, vykreslíme stránku bez štýlov a JavaScriptu.
Posttraumatická stresová porucha (PTSD) je charakterizovaná poruchou schopnosti neutralizovať reakcie strachu na podnety spojené s traumou.Štúdie na ľuďoch a zvieratách poukazujú na rozdiely v zapojení určitých oblastí frontálneho kortexu ako kľúčových mediátorov, ktoré rozhodujú o úspešnosti potláčania strachu, no nie je jasná súhra nervových okruhov, ktoré určujú rozdielne zapojenie týchto oblastí.Aby sme lepšie pochopili, ako sa jednotlivé rozdiely v pripomenutí extinkcie odrážajú v rozdieloch v aktivite neurónového okruhu, označili sme projekcie z potkanieho sublimbického kortexu (IL) retrográdnymi indikátormi a porovnali neurónové projekcie vo vnútri a mimo projekčných neurónov IL.Tieto údaje sme analyzovali a zoskupili sme ich podľa stupňa zachovania slabnúcej pamäte u potkanov.Zistili sme, že v bunkách premietajúcich IL vykazovali neuróny v zadnom paratalame zvýšenú aktivitu u potkanov, ktoré vykazovali dobrú pamäť na extinkciu.Okrem buniek premietajúcich IL bola zvýšená aktivita Fos pozorovaná vo vybraných oblastiach klaustra potkana a ventrálneho hipokampu s dobrým rozlíšením.Naše výsledky naznačujú, že rozdiely v pamäti o extinkcii sú spojené so špecifickými vzormi nervovej aktivity v rámci a mimo projekcií IL.
Podmieňovanie strachu nastáva, keď je neutrálny stimul spojený s averzívnym nepodmieneným stimulom (UCS), takže pôvodne neutrálny stimul, teraz podmienený stimul (CS), vyvoláva podmienenú reakciu strachu (CR) v neprítomnosti UCS.Zvrátenie podmieneného strachu bolo spôsobené poklesom CR na CS v dôsledku opakovanej prezentácie CS v neprítomnosti UCS1.Predchádzajúci výskum ukázal, že posttraumatická stresová porucha (PTSD) je spojená s neschopnosťou zapamätať si zánik podmienených reakcií strachu2.Základným kameňom kognitívno-behaviorálnej terapie pri liečbe posttraumatickej stresovej poruchy je expozičná terapia založená na zániku naučených reakcií strachu3,4.Preto štúdie individuálnych rozdielov v strachu z vyhynutia hlodavcov a základných nervových mechanizmoch môžu pomôcť objasniť rozdiely v ľudských reakciách na traumu a liečbu posttraumatickej stresovej poruchy.Napriek pokroku v identifikácii nervových mechanizmov, ktoré odlišujú úspešné a neúspešné spomienky na vyhynutie, je potrebné ešte veľa objaviť.
Modely hlodavcov sú v tejto práci užitočné, pretože existujú významné individuálne rozdiely v spomienkach na vyhynutie hlodavcov7,8,9,10.Predchádzajúca práca skúmajúca nervové mechanizmy zániku strachu na úrovni populácie ukázala, že aktivácia infralibickej kôry (IL) je potrebná na pripomenutie si zániku (odkazy 11, 12, 13, ale pozri 14) a niektoré štúdie zistili zníženie aktivita hlodavcov v IL vykazuje slabú pamäť o vyhynutí v porovnaní s hlodavcami, ktorých sa veľmi obáva.Mechanizmy, ktorými sa IL odlišne podieľajú na uľahčovaní eliminácie strachu u hlodavcov v porovnaní s tými, ktoré vykazujú slabšie vyhynutie, sú však nejasné.
Jednou z možností je, že rozdiely v pamäti vyhynutia strachu medzi jednotlivcami sú výsledkom rozdielnej aktivácie špecifických aferentných IL.Anatomické štúdie18 ukázali, že rôzne kortikálne a subkortikálne oblasti mozgu vysielajú husté projekcie do IL, ktoré zase vysielajú eferentné projekcie do mnohých oblastí mozgu.Štúdie na úrovni populácie ukázali, že projekcie IL do amygdaly sú dôležité na získanie zániku strachu20, 21, 22 a vstup IL z bazolaterálnej amygdaly (BLA) je tiež spojený s učením o zániku.Existuje menej výskumov o zapojení okruhov zameraných na IL pri odvolaní sa na extinkciu, hoci nedávna práca naznačuje, že do predpovede IL sa podieľa ventrálny aj dorzálny hipokampus.Eferentné projekcie IL do rekombinačného jadra talamu sa zrejme tiež podieľajú na spomienke na vyhynutie strachu.
Tieto predchádzajúce štúdie začínajú kresliť obraz interakcie nervových obvodov zapojených do pripomenutia zániku, ale existuje len veľmi málo údajov o tom, či aktivita v nervových obvodoch zameraných na IL ovplyvňuje individuálne rozdiely v pripomenutí zániku.Tu sme sa snažili zistiť, či rozdiely v pamäti vyhynutia strachu medzi jednotlivcami súvisia so zmenami v aktivácii vstupu IL v špecifických oblastiach mozgu.Hodnotili sme najmä aktiváciu IL aferentných buniek v paraventrikulárnom jadre talamu (PVT), kľúčnej kosti (CLA), BLA a ventrálnom hipokampe (vHPC).Tieto oblasti mozgu boli vybrané jednak preto, že vysielajú husté projekcie do IL, ako aj preto, že existuje dôvodné podozrenie, že by sa mohli podieľať na prejave vyhynutia strachu18.Napríklad nedávna štúdia ukázala, že PVT, oblasť, o ktorej je známe, že sa podieľa na získavaní strachu a reprodukcii, je potrebná na reprodukciu vyhynutia.Okrem toho predchádzajúce štúdie ukázali zvýšenú bazálnu amygdalu a aktivitu vHPC u potkanov s extinkčnou pamäťou.Napokon, analýza klaustra je viac prieskumná vzhľadom na to, že žiadna z predchádzajúcich prác nehodnotila jeho úlohu pri vyhynutí.Nedávna práca však naznačuje, že hrá úlohu v kontextovom podmieňovaní strachu29.
Vírusové GFP-konjugované retrográdne indikátory boli injikované do IL potkanov pred behaviorálnym testovaním a aktivita Fos v IL aferentoch bola meraná počas prehrávania extinkcie, pripomenutia strachu a u potkanov, ktoré neboli podrobené behaviorálnemu testovaniu.Naše výsledky naznačujú, že projekcie zo zadného paraventrikulárneho talamu do IL vykazujú zvýšenú aktivitu u potkanov, ktoré si úspešne pripomínajú vyhynutie.Okrem predpovedí IL sa neurálna aktivita v určitých oblastiach kľúčnej kosti a ventrálneho hipokampu zvýšila u potkanov, u ktorých došlo k dobrej regresii.Naše výsledky ukazujú, že vzorce vnútornej a vonkajšej nervovej aktivity premietnuté do IL sú spojené s individuálnymi rozdielmi v pamäti vyhynutia strachu.
Ako subjekty sa použilo 54 dospelých samcov potkanov Sprague-Dawley (300 až 325 g pri príchode) získaných od Charles River Laboratories (Raleigh, NC).Potkany boli chované v pároch s voľným prístupom k potrave a vode v 12-hodinovom cykle svetlo/tma (svetlá sa rozsvietili o 7:00).Na tieto experimenty sa použili dve skupiny potkanov (n = 28 an = 26).Po vylúčení smrti, chirurgickej chyby, nedostatočnej expresii GFP v cieľovom mieste, zlej kvalite tkaniva a problémoch so správaním (vysvetlené v časti Metódy), skupina privolávajúca vyhynutie zahŕňala 21 potkanov a skupina vyvolávajúca strach zahŕňala 7 potkanov v domácich klietkach.skupina pozostávala zo 7 potkanov (do konečnej analýzy bolo zahrnutých 35 potkanov).Všetky postupy boli schválené Inštitucionálnym výborom pre starostlivosť a používanie zvierat na univerzite Stony Brook a boli v súlade s usmerneniami ARRIVE (https://arriveguidelines.org) a pokynmi NIH pre starostlivosť a používanie laboratórnych zvierat.
Potkany boli liečené dva dni pred operáciou.Potkany sa anestetizovali ketamínom (87 mg/kg) a xylazínom (10 mg/kg), umiestnili sa do stereotaxického prístroja (Stoelting, Woodale, IL) a dostali jednostranné injekcie AAVrg-CAG-GFP (Addgene, 30) do IL.(vyvážte ľavú a pravú injekciu).Na injekciu bola na miesto spustená kanyla 22 gauge (AP: + 3,00, ML: ± 0,6, DV: – 5,2).Vložte 28G vnútornú kanylu (pripojenú k infúznej pumpe cez PE 20 hadičku) do vodiacej kanyly, aby ste dodali 0,6 µl vírusu rýchlosťou 0,15 µl za minútu a ponechajte ju na mieste 5 minút po neporušenej infúzii..Po zošití sa potkanom injikoval meloxikam (1 mg/kg) a hneď ako sa dokázali pohnúť, vrátili sa do klietok.Potkany boli držané vo svojich klietkach asi 7 týždňov, aby sa umožnila regenerácia vírusu a retrográdny transport.Tri potkany zomreli v anestézii, čo viedlo k tomu, že 51 potkanov (94 %) sa úspešne zotavilo z chirurgického zákroku.
Všetky postupy sa uskutočňovali v kondicionačných komorách s rozmermi 32 cm x 25 cm x 21 cm (Clever Systems Inc., Reston, VA) umiestnených v izolačných boxoch pohlcujúcich zvuk s rozmermi 45,7 cm x 43,2 cm x 43,2 cm (Clever Sys. Inc.).).Počas relácií učenia sa o vyhynutí a pripomenutia si vyhynutia sa kontext zmenil tak, aby sa líšil od pôvodného podmieneného kontextu.Podmienka A (generovanie strachu) zahŕňala 28-voltové žiarovky pre domácnosť (Chicago Micro Lighting, Spojené kráľovstvo), zatiaľ čo podmienka B (tréning na vyhynutie, test pripomenutia si vyhynutia a test pripomenutia strachu) zahŕňala infračervené LED lampy (Univivi IR Illuminator, Shenzhen). ., Čína;U48R).Navyše, kým Kontext A má antivibračnú lamelovú podlahu s nerezovými a plexi stenami, Kontext B obsahuje lakované kovové vložky umiestnené na podlahe a stenách.Tvar Context B bol tiež upravený umiestnením 33,5 cm x 21,3 cm zakrivenej kovovej vložky do štandardnej kondicionačnej komory.Okrem toho v kontexte A boli komory vytreté 5 % kyselinou octovou, zatiaľ čo v kontexte B boli komory vytreté 5 % hydroxidom amónnym.Nakoniec, v kontexte B, boli potkany privedené do testovacej miestnosti vo vedrách, namiesto toho, aby boli kotúľané v klietkach na vozíkoch.Behaviorálne relácie sa zaznamenávali hornou kamerou a video signál z každej kamery sa privádzal do softvéru (FreezeScan 2.00, Clever Sys. Inc., Reston, VA), ktorý vyhodnocoval blednutie na základe zmien pixelov.Parametre boli zvolené tak, aby sa správanie vyblednutia odhadnuté počítačom čo najviac zhodovalo so správaním vyškolených pozorovateľov odhadnutým ručne.Hodnota označujúca percento času zmrazenia zhrnutého v 30-sekundovom intervale.
Všetky programy správania sa vykonávajú počas svetlej časti cyklu svetlo/tma.Potkany boli ošetrené 5 dní pred začiatkom behaviorálnych procedúr a prevezené do behaviorálnej miestnosti na posledné tri dni liečby.V prvý deň behaviorálneho testovania bola skupina potkanov, u ktorých došlo k extinkcii, umiestnená do reflexu podmieneného strachom, potom bola umiestnená do kontextu A, bola im poskytnutá 6-minútová nestimulovaná aklimatizačná perióda a potom dostali obe kombinácie 4 kHz, 76 dB, 30 s. .tón a celkové ukončenie, 1,0 mA, kop 1 s (2 min ITI).Pre všetky behaviorálne tréningy boli potkany vrátené do klietok 2 minúty po poslednej prezentácii stimulu.Nasledujúci deň boli potkany zo skupiny vyhynutia-stiahnutia do kontextovej miestnosti B a vykonali 20 zvukových prezentácií (2 min ITI) ako tréning vyhynutia po 6-minútovom habituačnom období.Nasledujúci deň boli potkany v extinkčnej reprodukčnej skupine vystavené 4 tónom v kontexte B po 6-minútovej aklimatizačnej perióde ako test extinkcie.Potkany v skupine s extinkčnou pamäťou boli perfundované 60 minút po behaviorálnom sedení.Skupina kontrolných potkanov vyvolávajúcich spomienky strachu bola podrobená rovnakému postupu v prvý deň reakcie podmienenej strachom v kontexte A. O 48 hodín neskôr boli potkany umiestnené do kontextovej miestnosti B a podrobené 4 zvukovým prezentáciám (2- minúta ITI) ako test vyvolania.strach po 6-minútovej aklimatizačnej dobe.Potkany boli perfundované 60 minút po behaviorálnom sedení.Skupina domácich kontrolných potkanov zostala počas experimentu vo svojich domácich klietkach a boli perfundované v rovnaký deň ako experimentálne potkany.Každá z dvoch skupín potkanov bola rozdelená do dvoch sérií a počet zvierat v každej skupine bol medzi sériami vyvážený.Jeden potkan v skupine so spomienkami na strach bol z analýzy vylúčený, pretože nevykazoval známky podmieňovania strachu (zamrzol menej ako 15 % času počas testu spomienok na strach).Na obrázku 2A je znázornený diagram časovej osi správania.
Potkany boli predávkované roztokom Fatal Plus (100 mg/kg), potom boli perfundované ľadovo studeným 10 % PBS a následne 10 % pufrovaným formalínom.Mozog sa vybral a skladoval v 30 % roztoku sacharózy vo formalíne pri 4 °C počas približne 1 týždňa.Potom sa mozog zmrazil a narezal na kryostat s hrúbkou 40 um.Rezy sa skladovali postupne v 10 % PBS pri 4 °C.Potom sa uskutočnila imunofluorescencia na voľne plávajúcich rezoch obsahujúcich oblasť mozgu, ktorá je predmetom záujmu.Rezy sa premyli 3-krát v 10% PBS, každý 5 minút.Rezy sa potom inkubovali v 5 % blokujúcom roztoku normálneho kozieho séra počas 2 hodín pri teplote miestnosti a potom sa ešte trikrát premyli po dobu 5 minút v 10 % PBS.Rezy sa potom inkubovali cez noc pri 4 °C v primárnych protilátkach (c-Fos, #2250, 1:500) (Cell Signaling, Danvers, MA) zriedených v 1 % BSA v 10 % PBS.Nasledujúci deň boli rezy premyté v 10% PBS počas 30 minút pri 4 °C, potom 3-krát počas 5 minút v 10% PBS a inkubované so sekundárnou protilátkou (Alexa Fluor 594 kozia anti-králičia, červený konjugát, 1:500 ).) (Invitrogen, Carlsbad, CA) pri teplote miestnosti počas 2 hodín.Po 3 ďalších premytiach v 10 % PBS počas 5 minút sa rezy umiestnili na podložné sklíčka a uzavreli sa pomocou Fluoromount-G (Invitrogen).Pozri reprezentatívne obrázky imunofarbenia na obrázku 3G.
Fluorescenčný mikroskop využívajúci digitálnu kameru Infinity3 (Lumenera, Ottawa, Ontario, Kanada) a svetelný motor (Lumencor, Beaverton, OR) pripojený k mikroskopu Zeiss sa použil na získanie obrázkov z každej oblasti záujmu mozgu vrátane sekcií obsahujúcich IL bez imunofluorescencie.vykonať na potvrdenie správneho umiestnenia miesta vpichu.Obrázky použité na počítanie buniek sa získali pri 20-násobnom zväčšení.Pre každý rez tkaniva urobte jeden obrázok s filtrom, ktorý umožňuje vizualizáciu GFP a jeden obrázok s filtrom, ktorý umožňuje vizualizáciu červeného konjugátu Alexa Fluor v sekundárnej protilátke, a na zobrazenie sa použil zobrazovací softvér (Infinity Analyze, verzia 3). prekrytie.Získajte všetky snímky všetkých oblastí mozgu s použitím rovnakého času expozície a nastavení zisku.Šesť potkanov bolo z analýzy vylúčených, pretože hlavný prenos vírusu sa vyskytol mimo IL (88 % miera zasiahnutia).Osem ďalších potkanov bolo vylúčených, pretože napriek vírusu napádajúcemu IL, nevykazovali dostatočnú expresiu GFP vo všetkých cieľových oblastiach mozgu, ktoré sú predmetom záujmu.Okrem toho bol jeden potkan vylúčený z dôvodu zlej kvality tkaniva.
Upravte jas a kontrast na zníženie šumu pozadia na obrázku J (NIH) pomocou rovnakého postupu pre každý obrázok.Počty buniek pre celkové retrográdne označené bunky, celkový počet buniek označených Fos a celkový počet dvojito označených buniek vykonal manuálne experimentátor, ktorý neidentifikoval zvieratá, pomocou doplnku Image J cytometer.Počty buniek boli normalizované na bunky/mm2.Na analýzu expresie Fos v bunkách premietajúcich IL sa počet dvojito značených buniek normalizoval na celkový počet retrográdne značených buniek.Pre analýzu mBLA, mvHPC a pvHPC boli počty buniek z viacerých 20x obrazov sčítané a normalizované na bunky/mm2.Na analýzu zvyšku oblastí mozgu sa analyzoval 20x obraz alebo časť 20x obrazu a normalizovala sa na bunky/mm2.Analýza vHPC zahŕňala oblasti CA1, CA2 a subdominantné oblasti vHPC.Obrázok 1 ukazuje oblasti mozgu analyzované pomocou obrázkov vymedzujúcich predo-zadný okraj roviny.
Skratky a umiestnenie oblastí záujmu mozgu.Vysvetlenie skratiek a umiestnení oblastí mozgu uvedených v rukopise.Verejná mapa mozgu prevzatá z Swanson (2004) Mozgová mapa: Structure of the Rat Brain, 3. vydanie, licencovaná pod medzinárodnou licenciou Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-nc/ 4.0) ./), k dispozícii na stiahnutie na https://larrywswanson.com.
Percento doby zmrazenia je spriemerované za 30-sekundovú periódu prehrávania tónu, s výnimkou medziľahlých intervalov.Miery pripomenutia si vyhynutia sa vypočítali vyjadrením percenta času zoslabnutia počas trénovania extinkcie ako percento zoslabenia počas prvých 4 pokusov trénovania extinkcie (zoslabenie počas štyroch tónov pripomenutia extinkcie/zoslabenie počas prvých štyroch trénovacích tónov extinkcie*100).Nízke skóre znamená dobrú pamäť vyblednutia a vysoké skóre slabú pamäť vyblednutia.Potkany boli zoradené podľa skóre pripomenutia si vyhynutia, pričom potkany v hornej tretine skóre pripomenutia si vyhynutia boli klasifikované ako „krysy zo zlého vyhynutia“ a potkany v posledných dvoch tretinách skóre vymiznutia boli klasifikované ako „dobré“.Potkany s vyblednutím pamäte.
Neparametrické testy sa používajú, pretože údaje často porušujú predpoklady o normálnom rozdelení a/alebo homogenite rozptylov.Spearmanova poradová korelácia sa použila na určenie, či existuje významná súvislosť medzi skóre vyvolania extinkcie a markermi Fos a duálnymi markermi v oblastiach mozgu, ktoré sú predmetom záujmu u všetkých potkanov podrobených testu vyvolania extinkcie.Mann-Whitney U-test sa použil na určenie, či existuje rozdiel medzi dvoma nezávislými skupinami.Kruskal-Wallisov test sa používa na určenie, či sa 2 alebo viac skupín navzájom líšia, a Dunnov viacnásobný porovnávací test sa používa, keď je Kruskal-Wallisova štatistika významná.Vyblednutie počas učenia sa zániku bolo hodnotené pomocou analýzy variancie opakovaných meraní so skupinou ako intersubjektovým faktorom a testom ako vnútrosubjektovým faktorom. Výsledky sa považovali za významné, keď p < 0,05 pre všetky štatistické testy. Výsledky sa považovali za významné, keď p < 0,05 pre všetky štatistické testy. Результаты считались значимыми при p < 0,05 для всех статистических тестов. Výsledky sa považovali za významné pri p < 0,05 pre všetky štatistické testy.当所有统计检验的p < 0,05 时，结果被认为是显着的。当所有统计检验的p < 0,05 时，结果被认为是显着的。 Результаты считались значимыми при p < 0,05 для всех статистических тестов. Výsledky sa považovali za významné pri p < 0,05 pre všetky štatistické testy.
Obrázok 2 ukazuje časovú os experimentu (obrázok 2A) a distribúciu frekvencie všetkých potkanov vystavených vyhynutiu (obrázok 2B). Potkany v skupinách s dobrou a slabou extinkciou sa významne líšili v týchto vypočítaných skóre extinkcie (U = 0, p < 0,001) (obr. 2C). Potkany v skupinách s dobrou a slabou extinkciou sa významne líšili v týchto vypočítaných skóre extinkcie (U = 0, p < 0,001) (obr. 2C). КKысы в ​​групах с хорошим и п пим угашением значительbecьно различались эа э у у у у у у у у у у у у у у у у у. Potkany v skupinách s dobrou a slabou extinkciou sa významne líšili v týchto vypočítaných rýchlostiach vyhladzovania (U=0, p<0,001) (obrázok 2C).在这些计算的灭绝回忆分数中，良好和不良灭绝组中的大鼠存大鼠存在显着差卼嘾着差卼嘾着差傼傼傼 20. U = 0，p <0,001）））（图2C， Этих рассчитанных покатателях припоминия угашения крысы г гуз ххшим п п з з ( V týchto vypočítaných mierach extinkcie sa potkany v skupinách s dobrou a slabou extinkciou významne líšili (U = 0, p < 0,001) (obrázok 2C).Počas základného obdobia reflexného sedenia podmieneného strachom nebol žiadny významný rozdiel v čase zmrazenia medzi skupinami s dobrým vyhasnutím, slabým vyhasnutím a pripomenutím si strachu (X2 (2) = 2,746, p = 0,253) (obrázok 2D).Okrem toho počas prezentácie prvého tónu reflexu podmieneného strachom nebol medzi skupinami s dobrou extinkciou, slabou extinkciou a vybavovaním sa strachu signifikantný rozdiel v čase mrazenia (X2(2) = 1,107, p = 0,575), keďže ako aj počas strachu počas druhých tónov.Počas kondičného sedenia bol medzi skupinami významný rozdiel v čase zmrazovania s dobrým vyhynutím, zlým vyhasnutím a pripomenutím si strachu (X2 (2) = 2,214, p = 0,331) (obrázok 2D).Nebol tiež žiadny významný rozdiel v čase vyblednutia medzi skupinami s dobrým a zlým vyhynutím počas základného obdobia školenia na vyhynutie (U = 45,00, p = 0,799) (obrázok 2D). Ďalej tu bol významný hlavný vplyv skúšobného bloku (5 tónov na blok) na čas strávený zmrazením počas tréningu extinkcie (F (2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), čo naznačuje, že došlo k učeniu extinkcie (obr. 2D ). Ďalej tu bol významný hlavný vplyv skúšobného bloku (5 tónov na blok) na čas strávený zmrazením počas tréningu extinkcie (F (2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), čo naznačuje, že došlo k učeniu extinkcie (obr. 2D ). Затем наблюдался значительный основной эффект пробного блока (5 тонов на блок) на время, затрачиваемое на замирание во время тренировки угашения (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), что указывает на то, что обучение угашению происходило ( рис. 2D). Potom bol zaznamenaný významný hlavný účinok skúšobného bloku (5 tónov na blok) na čas potrebný na zmrazenie počas tréningu extinkcie (F(2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), čo naznačuje, že prebiehalo učenie sa extinkcie (obr. 2D). ).接下来 ， 在 消退 期间 ， 试块 （每 块 音 音） 对 冻结 时间 有 显着 主 （（2,884，54,80） = 8,331 ， p <0,001） ， 发生 了 消退 学习 （（图 图 2d））） .接下来 ， 在 消退 期间 ， 试块 （每 块 音 音） 对 冻结 时间 有 显着 主 （（2,884，54,80） = 8,331 ， p <0,001） ， 发生 了 消退 学习 （（图 图 2d））） . Затем, во время обучения угашению, пробные блоки (5 тонов на блок) оказали значительное основное влияние на время замирания (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), что указывает на то, что обучение угашению происходило (рис 2D). Potom, počas učenia sa zániku, mali skúšobné bloky (5 tónov na blok) významný hlavný vplyv na čas zoslabovania (F(2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), čo naznačuje, že prebiehalo učenie zániku (obr. 2D). .Extinkčná skupina (F(1, 19) = 3,091, p = 0,095) však nemala významný vplyv na čas vyblednutia počas celého obdobia trénovania extinkcie a neexistovala žiadna interakcia medzi skúšobným blokom a extinkčnou skupinou (F(4 , 19)).76) = 1,890, p = 0,121) (obr. 2D). Počas testovacej relácie bol medzi skupinami s dobrým vyhynutím, zlým vyhasnutím a pripomenutím si strachu v čase strávenom zmrazením počas základného obdobia (X2 (2) = 8,569, p = 0,014) taký, že skupina s pripomenutím strachu výrazne zamrzla. viac ako v skupine s dobrým vyhynutím (priemerný rozdiel v poradí = 10,57, p = 0,017), ale nie v skupine so zlým vyhynutím (priemerný rozdiel v poradí = − 3,714, p > 0,999) (obr. 2D). Počas testovacej relácie bol medzi skupinami s dobrým vyhynutím, zlým vyhasnutím a pripomenutím si strachu v čase strávenom zmrazením počas základného obdobia (X2 (2) = 8,569, p = 0,014) taký, že skupina s pripomenutím strachu výrazne zamrzla. viac ako v skupine s dobrým vyhynutím (priemerný rozdiel v poradí = 10,57, p = 0,017), ale nie v skupine so zlým vyhynutím (priemerný rozdiel v poradí = − 3,714, p > 0,999) (obr. 2D).Počas testovacej relácie bol významný rozdiel medzi skupinami s dobrým vyhynutím, zlým vyhasnutím a pripomenutím si strachu v čase strávenom zmrazením počas základného obdobia (X2(2) = 8,569, p = 0,014), takže skupina pri pripomenutí strachu zamrzla. výrazne .больше, чем в группе хорошего вымирания (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но не в группе плохого вымирания (средняя разница рангов = -3,714, p> 0,999) (рис. 2D). väčší ako v skupine s dobrým vyhynutím (priemerný rozdiel v poradí = 10,57, p = 0,017), ale nie v skupine so zlým vyhynutím (priemerný rozdiel v poradí = -3,714, p > 0,999) (obrázok 2D).在 测试 ， 良好 消退组 、 不良 消 退组 恐惧 回忆组 回忆组 在 基线期 时间 方面 存在 显着 （（x2 (2) = 8,569 ， p = 0,014） ， 因此 恐惧 回忆组 显着 超过 良好 灭绝 组 组 组 组 组 组（平均秩差= 10,57，p = 0,017），但不是差的灭绝组（平均秩差） – 3,714，p > 0,9 D9在 测试 ， 良好 消退组 、 消 退组 和 在 基线期 基线期 冻结 时间 存在 显着 差异 （（x2 (2) = 8,569 ， p = 0,014） ， 恐惧 回忆组 冻结 良好 的 组 组 组 组 组 组 组 组 组组 组 组 (平均秩差= 10,57, p = 0,017 ），但不是差绝组）平均秩差=（0゛9D9p > 3,714,29 D В течение периода тестирования наблюдалась значительная разница между группой с хорошим угашением, группой с плохим угашением и группой с припоминанием страха с точки зрения времени замирания на исходном уровне (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), поэтому припоминание страха группа замерзает значительно чаще , чем группа с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но не группа с плохим вымиранием (средняя разница рангов = -3,714, p> 0,999) (рис. 2D). Počas testovacieho obdobia bol významný rozdiel medzi skupinou s dobrým vyhynutím, skupinou so slabým vyhynutím a skupinou, v ktorej sa spomínal strach, pokiaľ ide o čas zmrazenia na začiatku (X2(2) = 8,569, p = 0,014), takže pripomenutie si strachu skupina zamrzne významne častejšie ako skupina s dobrou extinkciou (priemerný rozdiel v poradí = 10,57, p = 0,017), ale nie skupina so slabou extinkciou (priemerný rozdiel v poradí = -3,714, p > 0,999) (obrázok 2D).Skupina s dobrým vyhynutím, skupina so slabým vyhynutím a skupina s pripomenutím strachu mali tiež výrazne odlišné časy slabnutia počas tónovej prezentácie testovacej relácie (X2(2) = 14,93, p = 0,001), takže skupina s dobrým vyhynutím mala výrazne menej čas.čas zamrznutia ako v skupine slabej extinkcie (priemerný rozdiel v poradí = 9,286, p = 0,044) a v skupine so strachom (priemerný rozdiel v poradí = 13,86, p = 0,001) (obr. 2D).
Jednotlivé rozdiely v spomienkach na vyhynutie.(A) Náčrt chirurgických a behaviorálnych postupov.(B) Distribúcia frekvencií ukazujúca individuálne rozdiely v miznúcich pamäťových skóre.(C) Dôkaz, že skupiny navrhnuté na základe vypočítaného skóre vymiznutia predstavujú dva rôzne fenotypy.(D) Priemerné percento času, počas ktorého potkany zamrznú kvôli zlému vyhynutiu, dobrému vyhynutiu a pripomenutiu si strachu v 30-sekundových bunkách kondicionovaného reflexu strachu, v tónoch 20, 30 s, sa zrútili do 5 blokov počas relácie učenia sa vyhynutia (4 tóny) .každý) a v štyroch tónoch v reláciách spomienok na blednutie a spomienok na strach.Chybové stĺpce predstavujú štandardnú odchýlku priemeru. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05,**p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05,**p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001.
Do IL bol injikovaný retrográdny indikátor (obr. 3A) a bol stanovený počet GFP+ buniek pozdĺž predozadnej osi oblasti záujmu (obr. 3B-F).Medzi prednou, strednou a zadnou PVT bol signifikantný rozdiel v počte GFP+ buniek (X2(2) = 8,200, p = 0,017), takže mPVT vykazoval signifikantne viac GFP+ buniek ako aPVT (mean rank) Diff.= 18,37, p = 0,035) a pPVT (priemerný rozdiel v poradí = 17,71, p = 0,045) (obr. 3C).Hoci niekoľko zvierat nedetegovalo žiadne GFP+ bunky v pCLA, a preto nemohli zmapovať aktivitu v tejto oblasti, medzi prednou, strednou a zadnou CLA nebol žiadny významný rozdiel (X2(2) = 5,596, p = 0,061).Počet GFP+ buniek (obrázok 3D).Potom, keďže niektoré GFP+ bunky sa našli v aBLA alebo avHPC u niekoľkých potkanov, analyzovali sa iba stredná a zadná časť týchto oblastí.Stredná a zadná BLA (U = 393, p = 0, 009) sa významne líšili v počte GFP + buniek, takže pBLA vykazovala viac IL projekcií ako mBLA (obrázok 3E).Podobne bol významný rozdiel medzi strednými a zadnými vHPC, takže pvHPC vykazovali viac IL projekcií ako mvHPC (U = 403,5, p = 0,014) (obrázok 3F).Obrázok 3G je vzorový obrázok zobrazujúci Fos, aavRG-GFP a dvojito značené bunky.
Kvantifikujte aferenty IL v celej oblasti záujmu mozgu.(A) Schematické znázornenie distribúcie aavRG-CAG-GFP v celom potkanom IL.( B ) Reprezentatívne obrazy retrográdnych markerov na rôznych predozadných miestach v oblasti záujmu mozgu.Kvantifikácia retrográdneho značenia pozdĺž predozadnej osi (C) paraventrikulárny talamus, (D) kľúčna kosť, (E) bazolaterálna mandľa a (F) ventrálny hipokampus.(G) Reprezentatívne obrázky zobrazujúce retrográdne značenie aavRG, značenie Fos a dvojité značenie aavRG a Fos v aPVT.Chybové stĺpce predstavujú štandardnú odchýlku priemeru. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.Mierka 100 µm.Verejná mapa mozgu na paneli A je reprodukovaná zo Swanson (2004) Mozgová mapa: Rat Brain Structure, 3. vydanie, licencovaná pod medzinárodnou licenciou Creative Commons Attribution-NonCommons 4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-nc )./4.0/) k dispozícii na stiahnutie na https://larrywswanson.com.
Globálna a IL projekcia špecifická Fos aktivita bola analyzovaná v aPVT, mPVT a pPVT u všetkých potkanov.V expresii Fos v aPVT nebol žiadny významný rozdiel medzi dobrým vymieraním, zlým vymieraním, vyvolávaním strachu a domácimi bunkovými skupinami (X2(3) = 3,888, p = 0,274) (obr. 4A), ani neexistovala významná korelácia medzi Fos v aPVT medzi expresiou a extinkčným odvolaním (rs = 0,092, p = 0,691) (obrázok 4B) alebo medzi Fos expresiou v aPVT IL aferentoch a extinkčným vybavovaním (rs = 0,143, p = 0,537) (obrázok 4D).Avšak v aPVT IL aferentoch sa expresia Fos významne líšila medzi dobrou extinkciou, slabou extinkciou, strachom a domácimi bunkovými skupinami (X2 (3) = 15,05, p = 0,002), takže skupina pripomenutia strachu vykazovala relatívne dobré vyhynutie.regresia (priemerný rozdiel v poradí = 11,54, p = 0,003), skupiny so slabou regresiou (priemerný rozdiel v poradí = 10,57, p = 0,034) a s domácimi bunkami (priemerný rozdiel v poradí = 12,79, p = 0,005) (obr. 4C).Ďalej nebol žiadny významný rozdiel medzi dobrou extinkciou, slabou extinkciou, strachom a domácimi bunkovými skupinami pre expresiu Fos v mPVT (X2(3) = 2,272, p = 0,518) (obr. 4E) a pre expresiu Fos v mPVT..Významná korelácia s odvolaním sa na extinkciu (rs = 0,168 p = 0,468) (obrázok 4F).Hoci existoval významný rozdiel medzi dobrými, zlými, strachovými a domácimi bunkovými skupinami v expresii Fos v IL aferentných mPVT bunkách (X2(3) = 9,252, p = 0,026), post hoc porovnanie neodhalilo žiadne alebo dve.Významné rozdiely medzi skupinami (obrázok 4G).Okrem toho neexistovala žiadna významná korelácia medzi expresiou Fos v IL-aferentných mPVT bunkách a pamäťou extinkcie (rs = 0,174, p = 0,450) (obrázok 4H). Ďalej bol významný rozdiel medzi skupinami s dobrým vyhynutím, slabým vyhynutím, pripomenutím si strachu a v domácej klietke v expresii Fos v pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), takže skupina s dobrým vyhynutím (priemerné poradie Rozdiel = 14,96, p = 0,010), ale nie slabé vyhynutie (priemerný rozdiel v poradí = 12,86, p = 0,113) alebo skupina pripomenutia strachu (priemerný rozdiel v poradí = 2,571, p > 0,999), vykazovali viac výrazu Fos ako skupina v domácej klietke (obr. 4I). Ďalej bol významný rozdiel medzi skupinami s dobrým vyhynutím, slabým vyhynutím, pripomenutím si strachu a v domácej klietke v expresii Fos v pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), takže skupina s dobrým vyhynutím (priemerné poradie Rozdiel = 14,96, p = 0,010), ale nie slabé vyhynutie (priemerný rozdiel v poradí = 12,86, p = 0,113) alebo skupina pripomenutia strachu (priemerný rozdiel v poradí = 2,571, p > 0,999), vykazovali viac výrazu Fos ako skupina v domácej klietke (obr. 4I). Далее, наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха и домашней клеткой в ​​​​экспрессии Fos в pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), так что группа с хорошим угашением (средний ранг Diff. = 14,96, p = 0,010), но не в группе плохого угашения (средняя ранговая разница = 12,86, p = 0,113) или группы воспоминаний о страхе (средняя ранговая разница = 2,571, p > 0,999), демонстрировалась более выраженная экспрессия Fos, чем в группе группа домашних клеток (рис. 4I). Ďalej bol významný rozdiel medzi dobrým vyhynutím, zlým vyhynutím, pripomenutím si strachu a domácimi bunkovými skupinami v expresii Fos v pPVT (X2 (3) = 13, 89, p = 0, 003), takže skupina s dobrým vyhynutím (priemerné poradie Diff. = 14,96, p = 0,010), ale nie v skupine chudobnej extinkcie (priemerný rozdiel v poradí = 12,86, p = 0,113) alebo v skupine s pamäťou strachu (priemerný rozdiel v poradí = 2,571, p > 0,999), vykazovali výraznejšiu expresiu Fos ako v domáca bunková skupina (obrázok 4I).其次 ， PPVT 中 FOS 表达 好 消 差消 、 恐惧 和 和 家笼组 存在 显着 差异 （x2 （3） = 13,89 ， p = 0,003） 使得 使得 消组 （（（（Priemerné hodnotenie DIFFF.= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退(Priemerný rozdiel poradia = 12,86, p = 0,113) 或恐惧回忆组孻字孻孻孻孕孌孌子子).= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退 (priemerný rozdiel v poradí = 12,86, p = 0,113) ）。Po druhé, existovali významné rozdiely v expresii Fos v pPVT medzi dobrými, zlými, strachovými a domácimi bunkovými skupinami (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), čím sa stala skupina s dobrým príjmom (priemerný rozdiel v poradí = 14,96)., p = 0,010), но не хуже по угашению (средняя разница рангов = 12,86, p = 0,113) или группе отзыва страха (средняя разница рангов = 2,571, p > 0,999), чем в группе домашней клетки (рис. 4I) . , p = 0,010), ale nie horšie v skupine vyhynutia (priemerný rozdiel v poradí = 12,86, p = 0,113) alebo v skupine vyvolávajúcej strach (priemerný rozdiel v poradí = 2,571, p > 0,999) ako skupina domácich buniek (obrázok 4I)..Nezistila sa však žiadna významná korelácia medzi expresiou pPVT Fos a vyvolaním extinkcie (rs = 0,051, p = 0,825) (obrázok 4J).Nakoniec bol významný rozdiel v expresii Fos v pPVT IL aferentoch medzi skupinami s dobrou extinkciou, slabou extinkciou, spomienkami na strach a v domácich bunkách (X2(3) = 12,34 p = 0,006), takže dobrá expresia Fos v IL- bola horšie ako v extinkčných skupinách (priemerný rozdiel v poradí = 12,54, p = 0,014) a v domácej bunke (priemerný rozdiel v poradí = 12,89, p = 0,049) (obr. 4K) a významne koreloval s aferentmi IL v rámci pPVT medzi aktiváciou a zrušenie extinkcie, lepšie pripomenutie extinkcie bolo spojené s väčšou aktiváciou týchto aferentných IL (rs = -0,438, p = 0,047) (obrázok 4L).
Aktivita Fos bola zvýšená v IL aferentoch zadného paraventrikulárneho talamu (PVT) u potkanov, čo vykazovalo dobrú regresiu.(A) Medzi skupinami neboli žiadne významné rozdiely v expresii Fos v aPVT.(B) V aPVT nebola žiadna významná korelácia medzi expresiou Fos a vyvolaním extinkcie.(C) Skupina vyvolávajúca strach ukázala zvýšenú expresiu Fos v aferentných IL v porovnaní so všetkými ostatnými skupinami.(D) Neexistovala žiadna významná korelácia medzi expresiou Fos v aferentoch IL a odvolaním sa na extinkciu v aPVT.(E) Neexistovali žiadne významné medziskupinové rozdiely v expresii Fos v mPVT.(F) V mPVT nebola žiadna významná korelácia medzi expresiou Fos a pamäťou extinkcie.(G) Expresia Fos v aferentných IL bunkách v mPVT sa medzi skupinami významne nelíšila.(H) Neexistovala žiadna významná korelácia medzi expresiou Fos v aferentoch IL a odvolaním sa na extinkciu v mPVT.(I) Dobre vyhynutá skupina, ale žiadna iná skupina, vykazovala zvýšenú aktivitu Fos v pPVT v porovnaní so skupinou v domácej klietke.(J) V pPVT nebola žiadna významná korelácia medzi expresiou Fos a vyvolaním extinkcie.(K) Skupina s dobrou extinkciou vykazovala zvýšenú expresiu Fos v aferentných bunkách IL v porovnaní so skupinou so slabou extinkciou a skupinou domácich buniek.(L) Existuje významná korelácia medzi expresiou Fos v aferentoch IL a vyvolaním extinkcie, takže dobré vyvolanie extinkcie je spojené s vyššou expresiou Fos v aferentoch IL.Chybové stĺpce predstavujú štandardnú odchýlku priemeru. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.
Vo všetkých skupinách sa potom analyzovala globálna a IL projekcia špecifická Fos aktivita v aCLA a mCLA potkanov. Medzi skupinami s dobrým vyhynutím, slabým vyhynutím, pripomenutím si strachu a skupinami v domácej klietke v expresii Fos v aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036) bol taký rozdiel, že skupina pripomenutia strachu (priemerný rozdiel hodnotenia = ( Obr. 5A). Medzi skupinami s dobrým vyhynutím, slabým vyhynutím, pripomenutím si strachu a skupinami v domácej klietke v expresii Fos v aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036) bol taký rozdiel, že skupina pripomenutia strachu (priemerný rozdiel hodnotenia = ( Obr. 5A). Между группами с хорошим угашением, плохим угашением, припоминанием страха и домашними клетками наблюдалась значительная разница в экспрессии Fos в aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), так что группа припоминания страха (среднее ранговое различие = 14,50, p = 0,049), но ни плохая (средняя ранговая разница = 10,21, p = 0,373), ни группа с хорошим вымиранием (средняя ранговая разница = 4,607, p > 0,999) не демонстрировали большей экспрессии Fos, чем группа в домашней клетке ( Рис 5A). Existoval významný rozdiel v expresii aCLA Fos medzi skupinami dobrého vyhynutia, slabého vyhynutia, vyvolania strachu a domácich buniek (X2(3) = 8,455, p = 0,036), takže skupina pripomenutia strachu (priemerný rozdiel v poradí = 14,50, p = 0,049), ale ani chudobná (priemerný rozdiel v poradí = 10,21, p = 0,373), ani skupina s dobrou extinkciou (priemerný rozdiel v poradí = 4,607, p > 0,999) nevykazovali väčšiu expresiu Fos ako skupina domácich buniek (obr. 0,5A) . acla 中 fos 表达 的 良好 消退 、 消退差 恐惧 回忆 和 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 (x2 (3) = 8,455, p = 0,036) ， 因此 恐惧 恐惧 回忆组 (stredná hodnota dif. = 14,50 ， p = p = 0,049） ， 但 无论是 差 （平均 秩差 = 10,21 ， p = 0,373） 还是 良好 灭绝 平均 秩差 秩差 秩差 的 的 的 的 的 Fos 表达 表达 （（图 图 5A) . ACLA 中 FOS 表达 的 消退 、 消退差 、 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 差异 差异 差异 (x2 (3) = 8,455, p = 0,036) ， 因此 恐惧 恐惧 回忆组 回忆组 回忆组 (stredné Rank diff. = 14,50 ， p = p = p = p = p = 14. 0,049） ， 但 无论是 差 平均 秩差 秩差 = 10,21 ， p = 0,373） 良好 灭绝 （平均 秩差 秩差 = 4,607 ， p> 0,999） 组 都 出 比 家庭 笼组 更 多 的 表达 图 图 图 5a) 。 Была значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашением, отзывом страха и домашней клеткой по экспрессии Fos в aCLA (X2(3) = 8,455, p = 0,036), поэтому группа отзыва страха (среднее ранговое различие = 14,50) , p = 0,049), но группы с плохим (средняя разница рангов = 10,21, p = 0,373) и с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 4,607, p > 0,999) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа с домашней клеткой (рис. 5A). V expresii aCLA Fos bol signifikantný rozdiel medzi dobrým vyhynutím, slabým vyhynutím, pripomenutím si strachu a domácimi bunkami (X2(3) = 8,455, p = 0,036), takže skupina pripomenutia strachu (priemerný rozdiel v poradí = 14,50), p = 0,049 ), ale skupiny so slabým (priemerný rozdiel v poradí = 10,21, p = 0,373) a dobrým vymieraním (priemerný rozdiel v poradí = 4,607, p > 0,999) vykazovali vyššiu expresiu Fos ako domáca bunková skupina (obr. 5A). .Neexistovala žiadna významná korelácia medzi globálnou expresiou Fos v (rs = 0,036, p = 0,876) (obrázok 5B) alebo expresiou Fos v aferentných bunkách IL aCLA (rs = -0,282, p = 0,215) a odvolaním sa na extinkciu (obrázok 5B).0,5D), nebol tiež žiadny významný rozdiel medzi dobrou extinkciou, slabou extinkciou, strachom a domácimi bunkovými skupinami v expresii Fos v aCLA IL aferentoch (X2(3) = 6,722, p = 0,081) (obrázok 5C)..). Ďalej bol medzi skupinami s dobrým vyhynutím, slabým vyhynutím, pripomenutím si strachu a skupinami v domácej klietke v expresii Fos v mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018) taký, že skupina s dobrým vyhynutím (priemerný rozdiel v poradí = 12,93, p = 0,038), ale ani slabé vymieranie (priemerný rank rozdiel = 5,143, p > 0,999), ani skupiny vyvolávajúce strach (priemerný rank rozdiel = 14,00, p = 0,063) nevykazovali významne vyššiu expresiu Fos v mCLA vzhľadom na skupinu v domácej klietke (obr. 5E). Ďalej bol medzi skupinami s dobrým vyhynutím, slabým vyhynutím, pripomenutím si strachu a skupinami v domácej klietke v expresii Fos v mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018) taký, že skupina s dobrým vyhynutím (priemerný rozdiel v poradí = 12,93, p = 0,038), ale ani slabé vymieranie (priemerný rank rozdiel = 5,143, p > 0,999), ani skupiny vyvolávajúce strach (priemerný rank rozdiel = 14,00, p = 0,063) nevykazovali významne vyššiu expresiu Fos v mCLA vzhľadom na skupinu v domácej klietke (obr. 5E). Затем наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашением, воспоминаниями о страхе и домашней клеткой в ​​​​экспрессии Fos в mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), так что группа с хорошим угашением (средняя разница рангов . = 12,93, p = 0,038), но ни группы плохого угашения (средняя ранговая разница = 5,143, p > 0,999), ни группы отзыва страха (средняя ранговая разница = 14,00, p = 0,063) не показали значительно большей ako Fos v mCLA. Potom bol významný rozdiel medzi dobrým vyhynutím, zlým vymieraním, spomienkami na strach a domácimi bunkovými skupinami v expresii mCLA Fos (X2(3) = 10,12, p = 0,018), takže skupina s dobrým vyhynutím (priemerné poradie rozdielu = 12,93, p = 0,038), ale ani skupiny so zlým vyhynutím (priemerný rozdiel v poradí = 5,143, p > 0,999), ani skupiny so strachom (priemerný rozdiel v poradí = 14,00, p = 0,063) nepreukázali významne vyššiu expresiu Fos v mCLA.v porovnaní so skupinou v domácej klietke (obrázok 5E).接下来 ， 在 mclA 中 的 fos 表达 ， 良好 、 不良 不良 退组 、 恐惧 回忆组 笼组 显着 差异 （（x2 （3） = 10,12 ， p = 0,018） ， 良好 （（（（（（（（（（（（（（（（ （（（ Priemerný rozdiel v poradí .= 12,93, p = 0,038) ， 但 在 mclA 中 ， 弱消退 （秩差 秩差 = 5,143 ， p> 0,999） 和 恐惧 回忆组 （平均 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差相对于家庭笼组（图5E）。 = 12,93, p = 0,038) ， 在 在 mclA 中 ， 弱消退 （平均 秩差 秩差 = 5,143 ， p> 0,999） 和 回忆组 （平均 秩差 秩差 = 14,00 ， p = 0,063） 未 出 更 多 的 的fos 表达 表达 的 fos 表达 表达 的 fos 表达相对于家庭笼组（图5E）。 Далее, в экспрессии Fos в mCLA наблюдалась значительная разница между группой с хорошим угасанием, группой с плохим угасанием, группой с отзывом о страхе и группой с домашней клеткой (X2(3) = 10,12, p = 0,018), так, группа хорошего угашения (средняя разность рангов = 12,93, p = 0,038), но в mCLA ни слабое угасание (средняя разница рангов = 5,143, p > 0,999), ни группа отзыва страха (средняя разница рангов = 14,00, p = 0,999) = 0,063) показали лучшую экспрессию Много Fos по сравнению с группой с домашнекой 5 домашней Ďalej bol významný rozdiel v expresii Fos v mCLA medzi skupinou s dobrým vyhynutím, skupinou so slabým vyhynutím, skupinou so spätnou väzbou strachu a skupinou domácich buniek (X2(3) = 10,12, p = 0,018), teda dobrými extinkcia (priemerný rozdiel v poradí = 12,93, p = 0,038), ale v mCLA sa lepšie neukázalo ani slabé vyhynutie (priemerný rozdiel v poradí = 5,143, p > 0,999), ani skupina vyvolávajúca strach (priemerný rozdiel v poradí = 14,00, p = 0,999) = 0,063 Expresia Multi Fos v porovnaní s domácou bunkovou skupinou (obrázok 5E).Avšak globálna expresia Fos v mCLA (rs = 0,321, p = 0,156) (obr. 5F) alebo v aferentných IL mCLA bunkách (rs = -0,121, p = 0,602) a extinkčná pamäť (obr. 5H), žiadny významný rozdiel medzi skupiny s dobrou extinkciou, slabou extinkciou, vybavovaním strachu a domácou bunkou pre expresiu Fos v IL mCLA aferentných bunkách (X2(3)=4,923, p=0,178) (obrázok 5G).
Fos aktivita bola zvýšená v strednej časti klaustra u potkanov s dobrou pamäťou na extinkciu.(A) Skupina pripomenutia strachu, ale nie ostatné skupiny, vykazovala zvýšenú aktivitu Fos v porovnaní s domácou bunkovou skupinou v aCLA.(B) Neexistovala žiadna významná korelácia medzi expresiou Fos v aCLA a odvolaním sa na extinkciu.(C) Expresia Fos v IL aferentných aCLA bunkách sa medzi skupinami významne nelíšila.(D) Neexistovala žiadna významná korelácia medzi expresiou Fos v aferentoch IL a odvolaním sa na extinkciu v aCLA.( E ) Dobre vyhynutá skupina, ale nie ostatné skupiny, vykazovala zvýšenú aktivitu Fos v mCLA v porovnaní s domácou bunkovou skupinou.(F) Nebola žiadna významná korelácia medzi expresiou Fos a vyvolaním extinkcie v mCLA.(G) Expresia Fos v aferentných bunkách IL mCLA sa medzi skupinami významne nelíšila.(H) Neexistovala žiadna významná korelácia medzi expresiou Fos v aferentoch IL a odvolaním sa na extinkciu v mCLA.Chybové stĺpce predstavujú štandardnú odchýlku priemeru. *p < 0,05. *p < 0,05. *р < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *р < 0,05. *p < 0,05.
Potom sa analyzovala globálna a IL projekčne špecifická Fos aktivita v mBLA a pBLA vo všetkých skupinách potkanov.V expresii Fos v mBLA nebol žiadny významný rozdiel medzi dobrou extinkciou, slabou extinkciou, strachom a domácimi bunkami (X2 (3) = 0,944, p = 0,815) (obrázok 6A).Nebol tiež žiadny významný rozdiel medzi skupinami s dobrou regresiou, slabou regresiou, vybavovaním si strachu a expresiou Fos v domácich bunkách v aferentných bunkách IL mBLA (X2(3)=0,518, p=0,915) (obrázok 6C).Okrem toho neexistovala žiadna významná korelácia medzi globálnou expresiou Fos v mBLA (rs = 0,126, p = 0,588) (obrázok 6B) a expresiou Fos v aferentných bunkách IL mBLA (rs = 0,200, p = 0,385) (rs = 0,200, p = 0,385).p = 0,385).Obrázok 6D) a pripomenutie vyhynutia.Nebol tiež žiadny významný rozdiel v dobrej extinkcii, slabej extinkcii, pamäti strachu a domácich bunkových skupinách v expresii Fos v pBLA (X2(3) = 4,246, p = 0,236) (obr. 6E) a tiež nebol žiadny významný rozdiel v pBLA Dobrý.zánik, slabé vyhynutie, vyvolanie strachu a domáce bunkové skupiny v expresii Fos v IL aferentných bunkách (X2(3) = 1,954, p = 0,582) (obrázok 6G).Nakoniec globálna expresia Fos v pBLA (rs = 0,070, p = 0,762) (obr. 6F) a expresia Fos v aferentných bunkách pBLA IL (rs = 0,122, p = 0,597) a vyhladenie (obr. 6H).
Jednotlivé rozdiely v reprodukcii zániku neboli mapované na rozdiely v expresii Fos v bazolaterálnej amygdale.(A) Neexistovali žiadne významné medziskupinové rozdiely v expresii Fos v mBLA.(B) Nebola žiadna významná korelácia medzi expresiou Fos a pamäťou extinkcie v mBLA.(C) Expresia Fos v aferentných bunkách IL mBLA sa medzi skupinami významne nelíšila.(D) Neexistovala žiadna významná korelácia medzi expresiou Fos v aferentných bunkách IL a pamäťou extinkcie v mBLA.(E) Neexistovali žiadne významné medziskupinové rozdiely v expresii Fos v pBLA.(F) V pBLA nebola žiadna významná korelácia medzi expresiou Fos a vyvolaním extinkcie.(G) Expresia Fos v aferentných IL pBLA bunkách sa medzi skupinami významne nelíšila.(H) Neexistovala žiadna významná korelácia medzi expresiou Fos v aferentných bunkách IL a pamäťou extinkcie v pBLA.Chybové stĺpce predstavujú štandardnú odchýlku priemeru.
Nakoniec sa analyzovala globálna a IL projekčne špecifická Fos aktivita v mvHPC a pvHPC u všetkých potkanov. Medzi skupinami s dobrým vyhynutím, slabým vyhynutím, pripomenutím si strachu a skupinami v domácej klietke v expresii Fos v mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045) bol taký rozdiel, že dobré vyhynutie (priemerný rozdiel v poradí = 13,29 , p = 0,031), ale ani slabé vyhynutie (priemerný rozdiel v poradí = 6,857, p > 0,999), ani odvolanie sa na strach (priemerný rozdiel v poradí = 8,000, p = 0,864) skupiny nevykazovali väčšiu expresiu Fos ako skupina v domácej klietke (obr. 7A). Medzi skupinami s dobrým vyhynutím, slabým vyhynutím, pripomenutím si strachu a skupinami v domácej klietke v expresii Fos v mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045) bol taký rozdiel, že dobré vyhynutie (priemerný rozdiel v poradí = 13,29 , p = 0,031), ale ani slabé vyhynutie (priemerný rozdiel v poradí = 6,857, p > 0,999), ani odvolanie sa na strach (priemerný rozdiel v poradí = 8,000, p = 0,864) skupiny nevykazovali väčšiu expresiu Fos ako skupina v domácej klietke (obr. 7A). Между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха и домашними клетками наблюдалась значительная разница в экспрессии Fos в mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), так что хорошее угасание (средняя ранговая разница = 13,29) , p = 0,031), но ни в группах с плохим угасанием (средняя ранговая разница = 6,857, p > 0,999), ни в группе с отзывом страха (средняя ранговая разница = 8,000, p = 0,864) экспрессия Fos была выше, чем в группе с домашней клеткой (рис. 7А). Bol významný rozdiel v expresii mvHPC Fos medzi skupinami s dobrou extinkciou, slabou extinkciou, vybavovaním strachu a domácimi bunkami (X2(3) = 8,056, p = 0,045), takže dobrá extinkcia (priemerný rozdiel v poradí = 13,29), p = 0,031), ale ani v skupine s chudobnou extinkciou (priemerný rozdiel v poradí = 6,857, p > 0,999), ani v skupine s pripomenutím strachu (priemerný rozdiel v poradí = 8,000, p = 0,864) nebola expresia Fos vyššia ako v domácej skupine.bunka (obr. 7A). MVHPC 中 fos 表达 的 消退 、 不良 消退 、 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 差异 （x2 (3) = 8,056, p = 0,045） ， 因此 良好 消退 （秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差） ， 但 无论是 （（平均 秩差 = 6,857 ， p> 0,999） 还是 恐惧 回忆 平均 秩差 = 8 000 ， p = 0,864） 组都 显示 出 比 家庭 笼组 更 的 表达 （图 图）。。 MVHPC 中 fos 表达 的 消退 不良 消退 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 （（x2 (3) = 8,056, p = 0,045） ， 良好 良好 （（秩差 秩差 = 13,29） p = 0,031） ， 但 无论是 弱消退 （平均 秩差 秩差 = 6,857 ， p> 0,999） 还 是 恐惧 平均 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 ， ， ， ， 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 ))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))) Имелась значительная разница между группами «хорошо», «плохо», «припоминание страха» и «домашняя клетка» для экспрессии Fos в mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) и, следовательно, хорошая регрессия (средняя разница рангов = 13,29), p = 0,031), но группы со слабым угасанием (средняя разница рангов = 6,857, p > 0,999) и воспоминания о страхе (средняя разница рангов = 8,000, p = 0,864) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа в домашней клетке (рис. 2). Pre expresiu Fos v mvHPC bol významný rozdiel medzi dobrými, zlými, strachovými a domácimi bunkovými skupinami (X2(3) = 8,056, p = 0,045), a teda dobrá regresia (priemerný rozdiel v poradí = 13,29), p = 0,031), ale skupiny so slabou extinkciou (priemerný rozdiel v poradí = 6,857, p > 0,999) a so spomienkami na strach (priemerný rozdiel v poradí = 8,000, p = 0,864) vykazovali vyššiu expresiu Fos ako skupina v domácej klietke (obr. 2).7A).Nezistil sa však žiadny významný rozdiel (X2(3) = 4,893, p = 0,180) (obrázok 7C).Okrem toho neexistovala žiadna významná korelácia medzi globálnou expresiou Fos v mvHPC (rs = -0,233, p = 0,309) (obrázok 7B) a expresiou Fos v aferentných IL bunkách mvHPC (rs = 0,056, p = 0,810) (obrázok 7D).a správu o nezvestnosti.Ďalej nebol žiadny významný rozdiel medzi dobrým vyhynutím, zlým vyhynutím, pripomenutím strachu a domácimi bunkovými skupinami v expresii Fos v pvHPC (X2 (3) = 3, 623, p = 0, 353) (obrázok 7E) a neboli žiadne významné rozdiely.rozdiel v dobrej regresii expresie Fos v pvHPC aferentných IL bunkách, slabá regresia, pamäť strachu a domáce bunkové skupiny (X2(3)=3,871, p=0,276) (obr. 7G).Nakoniec neexistovala žiadna významná korelácia medzi globálnou expresiou Fos pvHPC (rs = -0,127, p = 0,584) (obrázok 7F) a expresiou Fos v IL-aferentných pvHPC bunkách (rs = 0,176, p = 0,447) a odvolaním sa na extinkciu (obrázok 7F ).7H).
Expresia Fos je zvýšená vo ventrálnom hipokampe potkanov, čo naznačuje dobré vyhladenie pamäte.(A) Dobre vyhynutá skupina, ale nie ostatné skupiny, vykazovala zvýšenú expresiu Fos v mvHPC v porovnaní s domácou bunkovou skupinou.(B) V mvPHC nebola žiadna významná korelácia medzi expresiou Fos a vyvolaním extinkcie.(C) Expresia Fos v mvHPC aferentných IL bunkách sa medzi skupinami významne nelíšila.(D) Neexistovala žiadna významná korelácia medzi expresiou Fos v aferentoch IL a pamäťou extinkcie v mvHPC.(E) Medzi skupinami neboli žiadne významné rozdiely v expresii Fos v pvHPC.(F) V pvHPC nebola žiadna významná korelácia medzi expresiou Fos a vyvolaním extinkcie.(G) Expresia Fos v pVHPC aferentných IL bunkách sa medzi skupinami významne nelíšila.(H) Neexistovala žiadna významná korelácia medzi expresiou Fos v aferentoch IL a vyvolaním extinkcie v pvHPC.Chybové stĺpce predstavujú štandardnú odchýlku priemeru. *p < 0,05. *p < 0,05. *р < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *р < 0,05. *p < 0,05.Naša primárna analýza pre všetky oblasti ukázala porovnanie na troch úrovniach pozdĺž predozadnej osi, hoci sme analyzovali aj každú oblasť, ktorá sa zrútila pozdĺž predozadnej osi.Výsledky týchto analýz sú uvedené v tabuľke 1.
Tu sme testovali, či by sa individuálne rozdiely v pripomenutí extinkcie odrazili v rôznych vzorcoch aferentnej aktivity v kôre dolnej limby.Na tento účel sme hodnotili aktivitu Fos v projekciách IL z paraventrikulárneho talamu, klaustra, bazolaterálnej mandle a ventrálneho hipokampu po prehratí zániku.V bunkách premietajúcich IL sme zistili vyššiu aktivitu v zadnej oblasti PVT u potkanov, ktoré vykazovali dobrú pamäť na extinkciu v porovnaní s potkanmi so slabou extinkciou.Nezistili sa žiadne rozdiely v aferentoch IL z klavikulárneho jadra, ventrálneho hipokampu alebo bazolaterálnej mandle.Okrem buniek premietajúcich IL bola pozorovaná zvýšená nervová aktivita vo vybraných oblastiach klaustra potkana a ventrálneho hipokampu s dobrým rozlíšením.Naše výsledky naznačujú, že úspešná extinkčná pamäť je organizovaná špecifickými PVT projekciami na IL a non-IL-cielené bunky v klaustri a ventrálnom hipokampe.
Zistili sme, že predpoveď PVT IL bola aktívna u potkanov, ktoré vykazovali dobré pripomenutie si extinkcie, čo je v súlade s nedávnou štúdiou, ktorá ukazuje, že PVT je potrebná na stiahnutie extinkcie.Táto štúdia nepoužila manipulácie špecifické pre subregión, ale ukázala, že projekcie PVT na laterálnej centrálnej amygdale a projekcie IL na PVT boli potrebné na reprodukciu vyhynutia.Naše výsledky naznačujú, že okrem reťazca IL-PVT-CeL môže byť potrebný aj vstup po PVT do IL na obnovenie zhášania.Ukazuje sa teda, že na reprodukcii zániku sa podieľajú eferentné aj aferentné IL spojenia.Ďalším dôležitým krokom je určiť, čo spôsobuje, že pPVT signalizuje extinkčnú reprodukciu na úrovni nervového okruhu.Okrem vzťahu s IL predchádzajúce štúdie sledovania kanálov31,32 ukázali, že pPVT dostáva vstup z ventrálnej periaqueduktálnej sivej (vPAG), ktorá je spojená s učením sa zániku33,34,35,36.Hoci úloha vPAG pri odvolávaní sa na vyhynutie nebola stanovená, predpoveď pPVT pomocou vPAG je atraktívnym kandidátom vzhľadom na ich hustotu a zapojenie oboch regiónov do vytvárania predchádzajúcich dôkazov o vyhynutí strachu.
Ďalším dôležitým aspektom našich výsledkov PVT je, že sú špecializované pozdĺž ich predno-zadnej osi.Prekvapivo, neurónová aktivita PVT projekcie v IL koreluje s opačným behaviorálnym stavom, takže aktivita pred PVT projekciou v IL je spojená s vyvolávaním strachu, zatiaľ čo pPVT projekcia je aktívna po úspešnom vymiznutí pamäte (tj strach).Táto funkčná heterogenita v rámci PVT nie je prekvapujúca vzhľadom na predchádzajúcu prácu [diskutované v 37].Pozoruhodný príklad funkčnej distribúcie v PVT sa nedávno objavil v štúdii, ktorá charakterizovala vlastnosti špecifických typov buniek v PVT.Táto štúdia ukazuje, že dopamínové bunky exprimujúce DRD2 sú prevažne exprimované v pPVT, inervujú kôru prednej končatiny a reagujú na averzívne stimuly.Druhá bunková populácia je prevažne exprimovaná v aPVT a označuje prechod do stavu nízkeho fyziologického vzrušenia a inervuje kôru dolných končatín.Naše výsledky len ťažko zapadajú do tohto vzoru, pretože aPVT bunky premietajúce IL sú aktívne počas vyvolávania strachu, zatiaľ čo projekcie pPVT sú aktívne a zvieratá vykazujú nízku úroveň strachu.Existujú minimálne dve možné vysvetlenia zjavného rozporu.Po prvé, identifikované typy buniek sa nenachádzajú výlučne v jednom predo-zadnom mieste TVV.Aktívne bunky pPVT premietajúce IL u potkanov s dobrou extinkčnou pamäťou teda môžu patriť do triedy buniek, u ktorých je väčšia pravdepodobnosť, že budú detegované v aPVT a signalizujú prechod do stavu nízkeho vzrušenia.To isté môže platiť pre bunky premietajúce IL v aPVT aktivovaných po spomienke na strach.Po druhé, predchádzajúce štúdie sledovania identifikovali prítomnosť pPVT s projekciou IL3, hoci sa zdá, že niektoré pochádzajú z buniek obsahujúcich DRD2, iné typy buniek sa môžu premietať do IL a aktivovať sa po úspešnej reprodukcii potlačenia.
Hoci cieľom tejto štúdie bolo identifikovať rozdiely medzi potkanmi vykazujúcimi rôzne fenotypy vyhynutia, tieto experimenty odhalili aj nové údaje súvisiace s mechanizmami pamäte strachu.Je zaujímavé, že u potkanov s pamäťou strachu sme zistili zvýšenú aktivitu Fos v prednej časti CLA.
Kľúčna kosť je umiestnená ako centrum kortikálnej komunikácie a je zapojená do procesov od senzorickej integrácie po pozornosť a spánok40,41,42,43.Existujú obmedzené dôkazy o tom, ako sa klaustrum podieľa na podmieňovaní strachu alebo prejave strachu, skorší výskum však ukázal, že kontextové vyjadrenie strachu sa podieľa na aktivite Fos v klaustre.Nedávno bolo hlásené, že inhibícia projekcií atrézie do entorinálneho kortexu počas kontextového podmieňovania strachu zhoršuje tvorbu dlhodobej pamäti, hoci ich potreba vyjadrenia strachu nebola testovaná.V tej istej štúdii bola pozorovaná zvýšená aktivácia Fos, keď boli zvieratá vystavené novému prostrediu v porovnaní s myšami vystavenými známemu prostrediu.S ohľadom na túto skutočnosť môže byť aktivácia CLA, ktorú tu uvádzame, spôsobená vystavením novému fotoaparátu počas testovania, a nie strachom zo samotného stiahnutia.Na presnejšiu charakteristiku funkcie zámkov pri strachu a situačnom spracovaní by budúce štúdie mali využívať cielenú manipuláciu so zámkami.
Hoci predchádzajúca práca ukázala, že PVT je spojená s prejavom pamäte strachu, 45, 46, 47 sme nepozorovali žiadnu zmenu v celkovej expresii Fos u potkanov, keď si spomenuli na strach 48 hodín po kondicionovaní.Tento rozdiel možno vysvetliť niekoľkými faktormi, vrátane predchádzajúcej práce testujúcej strach z diskrétnych podnetov v rovnakom kontexte, v akom prebiehalo kondicionovanie, zatiaľ čo v našom experimente sa testovanie uskutočnilo v novej miestnosti.Okrem toho sme naše zvieratá usmrtili 60 minút po testovaní, zatiaľ čo predchádzajúca práca používala časový bod 90 minút.Nakoniec, v predchádzajúcich štúdiách sa test uskutočnil v miestnosti, kde zvieratá mohli reagovať chuťou do jedla, zatiaľ čo v našej práci boli potkany testované bez reakcie na chuť do jedla.Aj keď to umožňuje určitý stupeň podmienenej inhibície, existujú dôkazy, že umožnenie zvieratám potlačiť tlak na získanie potravy pri testovaní, či sa obávajú podnetov, vytvára motivačný konflikt (tj strach verzus odmena), čo je kľúčový stimulačný faktor.účasť PVT48, 49. .
Je známe, že bazolaterálna amygdala sa podieľa na získaní zániku strachu50,51 a existujú dôkazy, že do tohto procesu sú zapojené aj projekcie BLA na IL23.Nie je však jasné, či sa BLA a jej prepojenia podieľajú na návrate vyhynutia.Zobrazovacie štúdie23,28 ukázali zvýšenú aktivitu BLA u zvierat, ktoré si pripomínajú vyblednuté spomienky.Zatiaľ čo naša predchádzajúca práca nepreukázala žiadny rozdiel v aktivácii BLA medzi dobrými a zlými extinkčnými potkanmi, naše výsledky tu naznačujú, že pripomenutie extinkcie vo všeobecnosti neovplyvňuje BLA alebo aktiváciu pri predpovedaní BLA IL.V súlade s našimi zisteniami, hoci štúdie manipulácie s obvodmi naznačujú, že vstupy IL do BLA sú dôležité pre učenie sa zániku, nie sú potrebné na pripomenutie zániku.Úlohu BLA však nemožno úplne ignorovať, pretože nedávne dôkazy naznačujú, že určité typy buniek v BLA sú potrebné na reprodukciu vyhynutia.
Pozoruhodné je, že pripomenutie si strachu neviedlo k aktivácii Fos v BLA, pretože predchádzajúce štúdie lézií, liekov a zobrazovacích metód implikovali túto oblasť pri vyjadrení strachu a/alebo opätovnom upevnení strachu po získaní54,55,56,57.Tu prezentované údaje kombinujú bazálne a laterálne subnukleus amygdaly a predchádzajúce údaje naznačujú, že expresia strachu poháňa Fos aktivitu na dorzálnej strane laterálneho jadra.Základné a bočné údaje sme analyzovali oddelene, ale v žiadnom prípade nebol žiadny rozdiel (údaje nie sú uvedené) a obe oblasti sa v údajoch, ktoré tu uvádzame, zrútili.Neanalyzovali sme podoblasti laterálnej amygdaly, takže špecifické zmeny v tejto oblasti môžu byť maskované.Ďalšia možnosť žiadnej zmeny v aktivite Fos v BLA je spôsobená načasovaním spomienok na strach v porovnaní s kondicionovaním.Niektoré predchádzajúce práce ukázali, že príspevok BLA k expresii strachu klesá s časom po kondicionovaní, takže expresia je závislá od BLA 24 hodín po kondicionovaní, ale nezávislá po 7 dňoch (odkaz 45, ale pozri 58).došlo 48 hodín po tréningu, takže neprítomnosť zmeny v aktivite Fos v tomto časovom bode pravdepodobne odráža časovo závislé zmeny v účasti BLA na prejave strachu.
Nakoniec nachádzame dôkaz, že pamäť na úspešné vyhynutie je spojená s ventrálnym hipokampom.Toto je charakteristické pre „stredné“ vHPC, pretože rovnaký vzor nebol pozorovaný v zadnej oblasti.V súlade s predchádzajúcou prácou sme nenašli žiadnu zmenu v aktivácii Fos v aferentných vHPC IL.Existuje podstatný dôkaz, že vHPC28,60,61 je potrebný na aktualizáciu strachu, keď sa CS vyskytne mimo kontextu, v ktorom dochádza k vyblednutiu, a že to závisí aspoň čiastočne od vstupu vHPC do IL13.Na základe týchto predchádzajúcich výsledkov by sme očakávali, že slabé vyblednutie bude spojené so zvýšenou predpovedanou IL aktivitou vHPC.Nebol to však tento prípad, pretože nebol žiadny rozdiel v aktivite Fos v IL-projektovaných retrográdne značených vHPC alebo neznačených bunkách vo vHPC.To naznačuje, že neschopnosť zapamätať si blednutie v kontexte blednutia môže spustiť iný mechanizmus ako strach z obnovy.
Je dôležité si všimnúť niektoré inherentné obmedzenia návrhu a analýzy a ako ovplyvňujú naše závery.Najprv sme rozdelili zvieratá na hornú a dolnú tretinu a myši na „dobré“ a „zlé“ na základe skóre vymiznutia.Robí sa to s cieľom vyhnúť sa skupinovým schémam, ktoré rozdeľujú zvieratá do samostatných skupín od stredu distribúcie, alebo skupinovým schémam, ktoré vylučujú zvieratá zo stredu distribúcie, ako je oddelenie podľa mediánu alebo porovnanie hornej a dolnej tretiny potkanov. .tejto situácii sa chceme vyhnúť, pretože delenie mediánu neodráža variabilitu ľudských reakcií na traumu, ktorú sa snažíme modelovať.Okrem toho, zatiaľ čo porovnávanie hornej a dolnej tretiny potkanov nám umožňuje porovnávať skupiny podobnej veľkosti, tento prístup ignoruje zvieratá v centre distribúcie a presne neodráža variabilitu reakcií na zranenie.Aj keď naša metóda môže trpieť problémami s heterogénnym rozptylom a porovnávaním skupín s nerovnakou veľkosťou vzoriek, zachytáva to, čo sa snažíme napodobňovať lepšie ako alternatívne metódy.
Tu prezentované výsledky nám pomáhajú lepšie pochopiť, ako sa jednotlivé rozdiely v spomienkach na vyhynutie odrážajú v rozdieloch v aktivite nervového okruhu.Naše zistenia môžu byť relevantné pre posttraumatickú stresovú poruchu, o ktorej je známe, že je spojená s nadmerným strachom a neschopnosťou eliminovať reakcie na strach.Ukazujeme, že rozdiely v pamäti o extinkcii sú spojené s rozdielmi vo vnútornej a vonkajšej nervovej aktivite premietnutej do IL.Tieto rozdiely boli rozdelené do rôznych oblastí pozdĺž predozadnej osi, čo ďalej zdôraznilo dôležitosť hodnotenia funkcie mozgu na subregionálnej úrovni.Nevýhody súčasnej metódy zahŕňajú relevantnosť štúdie a zameranie sa na samce hlodavcov.Budúci výskum by mal určiť neurobiologické mechanizmy, ktoré sú základom učenia o vyhynutí u samíc hlodavcov, a použiť metódy na vyvodenie kauzálnych záverov.
Súbory údajov použité a/alebo analyzované v súčasnej štúdii sú dostupné od príslušných autorov na základe primeranej žiadosti.
Pavlov IP Conditioning: štúdium fyziologickej aktivity mozgovej kôry.(Oxford University Press, 1927).
Rothbaum, BO, & Davis, M. Aplikácia princípov učenia na liečbu posttraumatických reakcií. Rothbaum, BO, & Davis, M. Aplikácia princípov učenia na liečbu posttraumatických reakcií.Rotbaum BO a Davis M. Aplikácia princípov učenia na liečbu posttraumatických reakcií.Rotbaum BO a Davis M. Aplikácia princípov učenia pri liečbe posttraumatických reakcií.Inštalácia.New York College.veda.1008(1), 112-121 (2003).
Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Prehľad expozičnej terapie: zlatý štandard liečby PTSD. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Prehľad expozičnej terapie: zlatý štandard liečby PTSD.Rauch SA, Eftekhari A. a Ruzek DI Prehľad expozičnej terapie: zlatý štandard liečby posttraumatickej stresovej poruchy. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI 暴露疗法回顾：PTSD Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Prehľad expozičnej terapie: Zlatý štandard pre liečbu PTSD.Rauch, SA, Eftekhari, A. a Ruzek, DI Prehľad expozičnej terapie: zlatý štandard liečby posttraumatickej stresovej poruchy.J. Rehabilitácia.vývoj nádrže 49, 679–687.https://doi.org/10.1682/jrrd.2011.08.0152 (2012).
Foa, EB Terapia s dlhou expozíciou: minulosť, prítomnosť a budúcnosť.Potláčanie úzkosti 28, 1043–1047.https://doi.org/10.1002/da.20907 (2011).
Pán Millard a spol.Existenčné a získané príčiny straty pamäti pri posttraumatickej stresovej poruche: zistenia z dvojitej štúdie.J. Psychiater.zásobná nádrž.42(7), 515-520 (2008).
Pán Millard a spol.Neurobiologický základ neschopnosti vybaviť si blednúce spomienky pri posttraumatickej stresovej poruche.biológia.Psychológia.66(12), 1075-1082 (2009).
Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Individuálne rozdiely v strachu: Izolácia reaktivity strachu a fenotypy obnovy strachu. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Individuálne rozdiely v strachu: Izolácia reaktivity strachu a fenotypy obnovy strachu.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. a LeDoux, JE Individuálne rozdiely v strachu: rozlíšenie fenotypov reaktivity strachu a obnovenia strachu. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE 恐惧的个体差异：隔离恐惧反应和恐惧恢复表型。 Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Individuálne rozdiely v strachu: izolácia reakcie na strach a tabuľka obnovy strachu.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. a LeDoux, JE Individuálne rozdiely v strachu: izolácia reakcií strachu a fenotyp obnovy strachu.J. Trauma.tlak 20(4), 413-422 (2007).
Russo, AS & Parsons, RG Akustická úľaková odozva u potkanov predpovedá interindividuálne variácie vo vyhynutí strachu. Russo, AS & Parsons, RG Akustická úľaková odozva u potkanov predpovedá interindividuálne variácie vo vyhynutí strachu.Russo, AS a Parsons, RG Akustická reakcia na úľak u potkanov predpovedá individuálne rozdiely vo vyhynutí strachu. Russo, AS & Parsons, RG 大鼠的声学惊吓反应预测恐惧消退的个体差异。 Russo, AS & Parsons, RGRusso, AS a Parsons, RG Akustická reakcia na úľak u potkanov predpovedá individuálne rozdiely vo vyhynutí strachu.Neurobiológia.štúdium.Pamäť.139, 157 – 164 (2017).
Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Individuálna variabilita v spomienke na vyhynutie strachu je spojená s fosforyláciou mitogénom aktivovanej proteínkinázy v infralimbickej kôre. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Individuálna variabilita v spomienke na vyhynutie strachu je spojená s fosforyláciou mitogénom aktivovanej proteínkinázy v infralimbickej kôre.Russo, AS, Lee, J. a Parsons, RG Individuálna variabilita v extinkcii strachu je spojená s mitogénom aktivovanou fosforyláciou proteínkinázy v infralimbickej kôre. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Spomienka na vyblednutie strachu súvisí s individuálnymi rozdielmi v periférnej fosforifikácii.Russo, AS, Lee, J. a Parsons, RG Jednotlivé rozdiely vo vyhynutí strachu počas pripomenutia súvisia s fosforyláciou mitogénom aktivovaných proteínkináz v kôre dolnej končatiny.Psychofarmakológia 236(7), 2039–2048 (2019).